摘要】  目的 研制可適用于Sysmex UF-50尿沉渣分析儀配套試劑。方法 自制UF-50配套試劑，利用熒光染色原理對尿液中的有形成分進(jìn)行染色，通過儀器的分析單元對有形成分進(jìn)行分析和計(jì)數(shù)。結(jié)果 自制試劑與原廠試劑對質(zhì)控液進(jìn)行的測試結(jié)果相近，CV值均小于10%。結(jié)論 自制的UF-50配套試劑可以取代原廠的試劑，可以達(dá)到節(jié)省試劑成本的目的 
【關(guān)鍵詞】  尿沉渣分析儀；尿液；配套試劑
    ［Abstract］  Objective  To develop an applicable supplementary reagent to be used on Sysmex UF-50 urinary sediment analyzer.Methods  Development of a dedicated supplementary reagent for UF-50 by using fluorescence staining principle to stain the formed elements in urine was performed.With this reagent and the analyzing unit of the instrument,the formed elements can thus be analyzed and counted.Results  By using quality control reagent,test results obtained from the comparison between self-developed reagent and the reagent provided by UF-50 manufacturer were  so similar that its CV value was less than 10%.Conclusion  In order to be cost-effective,self-developed reagent can be used to replace the reagent provided by UF-50 manufacturer.
    ［Key words］  urinary sediment analyzer;urine;supplementary reagent
    現(xiàn)今Sysmex（日本東亞）尿沉渣分析儀配套試劑一般為原廠提供或由G內(nèi)生產(chǎn)企業(yè)采用進(jìn)口試劑分裝，故試劑成本較高且供貨周期較長。部分G產(chǎn)試劑雖然價(jià)格相對便宜，但一般穩(wěn)定性較差，以上原因制約了醫(yī)院檢驗(yàn)科尿常規(guī)檢測尿沉渣計(jì)數(shù)分析項(xiàng)目的開展［1，2］。針對以上問題，我們對相關(guān)尿沉渣分析儀配套試劑進(jìn)行了研發(fā)，通過檢測證明我公司研發(fā)的相關(guān)試劑性能及穩(wěn)定性均較好，在保證測試效果的同時(shí)降低了尿沉渣計(jì)數(shù)的配套試劑使用成本，為配合G內(nèi)廣大臨床醫(yī)院檢驗(yàn)科尿沉渣計(jì)數(shù)分析項(xiàng)目向自動(dòng)化方向發(fā)展起到了一定的促進(jìn)作用。
    1  材料與方法
    1.1  材料
    1.1.1  儀器  Sysmex UF-50尿沉渣分析儀，冰點(diǎn)滲透壓計(jì)（上海醫(yī)大儀器廠），3250型電導(dǎo)率儀（上海任氏電子有限公司），pHS-3E型ph計(jì)（上海雷磁儀器廠）。
    1.1.2  試劑  （1）自制試劑尿稀釋液：氯化鈉4 g/L，4-羥乙基哌嗪乙磺酸11 g/L，氫氧化鈉0.5 g/L，EDTA（2K）4 g/L。尿染液：菲啶染料0.14 g/100 ml、羰花青染料0.04 g/100 ml、乙二醇100 ml。尿鞘液：氯化鈉7.1 g/L、三羥甲基氨基甲烷緩沖液 2.0 g/L、乙二胺四乙酸二鉀0.2 g/L、聚氧乙烯非離子表面活性劑0.8 g/L。將配好的尿稀釋液、尿染液、尿鞘液分別用0.1 μm濾芯過濾器加以過濾。（2）對比試劑：Sysmex原廠試劑CELL SHEATH（鞘液），批號：G7083；URINOCATCH DILUENT（尿稀釋液），批號：ZR8001；URINOSERCH（尿染液），批號：UR8001。
    1.1.3  測試標(biāo)本  UF CHECK（尿質(zhì)控），批號：A8002。
    1.2  方法
    1.2.1  試劑理化參數(shù)的比較  使用冰點(diǎn)滲透壓計(jì)、電導(dǎo)率儀、ph計(jì)分別測定原廠和自配試劑的滲透壓、電導(dǎo)率和pH值。
    1.2.2  對照試驗(yàn)  （1）按UF-50尿沉渣分析儀操作說明書進(jìn)行操作，shou先采用為原廠全套試劑，并執(zhí)行灌注程序，保證管路已經(jīng)灌滿原廠試劑，把原廠質(zhì)控液上下顛倒搖勻后滴于試管中，并再次搖勻試管中的質(zhì)控液后立即進(jìn)行測試，重復(fù)20次，計(jì)算平均值（x）和偏差值（CV%）。（2）將原廠試劑排空，待出現(xiàn)報(bào)警時(shí)換接上自配試劑，并執(zhí)行灌注程序，保證管路已經(jīng)灌滿自配試劑，把原廠質(zhì)控液上下顛倒搖勻后滴于試管中，并再次搖勻試管中的質(zhì)控液后立即進(jìn)行測試，重復(fù)20次，計(jì)算平均值（x）和偏差值（CV%）。
    2  結(jié)果
    2.1  兩種試劑主要理化參數(shù)的比較  見表1。
    2.2  對照試驗(yàn)
    2.2.1  原廠試劑與自配試劑對照試驗(yàn)質(zhì)控標(biāo)本數(shù)據(jù)結(jié)果  見表2。
    2.2.2  原廠試劑與自配試劑對照試驗(yàn)質(zhì)控標(biāo)本散點(diǎn)圖  見圖1、2。表1  理化參數(shù)的比較表2  質(zhì)控標(biāo)本數(shù)據(jù)
　　3  討論
　　UF-50尿沉渣分析儀是采用流式細(xì)胞熒光散射強(qiáng)度和電阻抗變化的原理來對尿液中的有形成分進(jìn)行綜合檢測。儀器自動(dòng)吸取定量的尿液后加以混合和稀釋，然后用氮雜菲和羰花青對尿中的細(xì)胞、管型、細(xì)菌等有形成分進(jìn)行染色，通過加壓使細(xì)胞進(jìn)入充滿鞘液的液流室，在鞘液的作用下，細(xì)胞排成單列，經(jīng)液流室的噴嘴噴出，形成的細(xì)胞柱與氬激光束垂直相交，使細(xì)胞產(chǎn)生熒光和光散射。光散射強(qiáng)度主要取決于細(xì)胞顆粒的大小，熒光強(qiáng)度與每種顆粒吸附的熒光染料量有關(guān)。不同的染色顆粒可產(chǎn)生不同的光散射強(qiáng)度和熒光強(qiáng)度。被染色的顆粒散射光和熒光越強(qiáng)，對應(yīng)前向光脈沖信號越強(qiáng)，這是定性和定量分析的基礎(chǔ)。分析儀還配備了電阻抗變化檢測系統(tǒng)，在流動(dòng)池的前、后方各裝有兩個(gè)電極并維持恒定的電流，當(dāng)尿液樣品通過儀器的液流室小孔時(shí)，隨著不同顆粒和物質(zhì)電阻抗的變化，兩個(gè)電極之間的電壓有相應(yīng)的變化。UF-50全自動(dòng)尿沉渣分析儀可以對紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型、細(xì)菌、結(jié)晶、上皮細(xì)胞等尿有形成分提供定量分析報(bào)告及散點(diǎn)圖，對于每一標(biāo)本檢測步驟模式一致，不受主觀因素影響，易于質(zhì)量控制和標(biāo)準(zhǔn)化，是一種高效率、高精度的可用于臨床治療監(jiān)控的尿沉渣過篩檢測儀器。但由于尿沉渣分析儀存在不能具體辨認(rèn)細(xì)胞形態(tài)及病理管型的類型的缺陷，故通常在臨床上只作為尿常規(guī)的篩查檢測。對其檢測的陽性標(biāo)本，檢驗(yàn)人員應(yīng)本著對患者負(fù)責(zé)的態(tài)度，在顯微鏡下再行復(fù)檢，為臨床的診斷、療效的觀察提供確定的證據(jù)［3～5］。 表1中Sysmex原廠試劑與自配試劑的pH值、滲透壓、電導(dǎo)率數(shù)值相當(dāng)，誤差均不超過10%，說明試劑濃度相當(dāng)，配方效果接近。表2為原廠試劑與自配試劑對照試驗(yàn)質(zhì)控標(biāo)本數(shù)據(jù)結(jié)果，其紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型、細(xì)菌、結(jié)晶、上皮細(xì)胞、電導(dǎo)率數(shù)據(jù)均較接近，CV值均小于10%。從圖1、圖2可以看出被測標(biāo)本質(zhì)控?zé)晒鈴?qiáng)度（Fl）、前向熒光脈沖寬度（Flw）、前向散射光強(qiáng)度（Fsc）、前向散射光脈沖寬度（Fscw）、電阻抗信號綜合分析的紅細(xì)胞、白細(xì)胞及顆粒等的散射圖分布位置接近。自配試劑經(jīng)過在G內(nèi)相關(guān)醫(yī)院的長期試用，并與進(jìn)口原裝Sysmex尿沉渣分析儀試劑和G內(nèi)的同類型其他廠家試劑進(jìn)行對比試驗(yàn)，證明我公司自配的尿沉渣分析儀配套試劑在標(biāo)本測試結(jié)果的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性方面均與進(jìn)口試劑相近，并優(yōu)于G內(nèi)一般同類型尿沉渣分析儀試劑，故也可以替代現(xiàn)有G產(chǎn)或進(jìn)口的同類型試劑。#p#分頁標(biāo)題#e#